Die Sammlungsschwerpunkte des Heimatmuseums bilden volkskundliche Objekte aus dem Eichsfeld. Über drei Stockwerke wird Geschichte aus der Region dargestellt.
Im Erdgeschoß befindet sich die Abteilung "Archäologie im Eichsfeld". Eine Besonderheit dieser Abteilung ist der freigelegte Teil der alten Stadtmauer, deren Reste unter dem Museumsgebäude verlaufen. In der ersten Etage wird außer dem heimischen Handwerk (Metall- und Holzverarbeitung) auch das frühindustrielle Gewerbe (Schuhmacherwerkstatt) behandelt, dazu der einstige "Tabakanbau und die Tabakverarbeitung im Eichsfeld".
Ausgewählte Objekte aus Kirchen des Eichsfeldes geben zudem einen Einblick in die wechselvolle Kirchengeschichte der Region.
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